小鼠CD4+CD25+调节性T细胞分选试剂盒

起始样本为小鼠脾脏（C57BL/6L，6-8 weeks），使用本品从C57小鼠脾脏制备的高活性单细胞悬液中分选CD4+CD25+的Treg细胞，分选前CD4+CD25+细胞占比为1.65%，分选后细胞纯度提升至95.53%（以具活性的单细胞圈门），如下为示例样本流式代表图（图a）。多次重复实验表明，使用本品分选获得的CD4+CD25+的 Treg 细胞纯度稳定高于90%，与进口对比表现优异（图b）。

试剂盒在另一常见品系中同样表现优异，使用本品从ICR小鼠脾脏中分选CD4+CD25+的Treg细胞，分选前CD4+CD25+细胞占比为2.88%，分选后细胞纯度提升至90.60%（以具活性的单细胞圈门），如下为示例样本流式代表图（图a），多次重复实验均显示分选后细胞纯度稳定高于90%，与进口品牌对比表现优异（图b）。

磁珠分选是否损伤细胞活性，是下游功能实验成败的关键。本试剂盒采用的纳米级磁珠（50nm）外层为生物亲和性材料，可最大限度减少细胞应激。

我们使用流式细胞术对比了细胞分选前后的细胞活率。结果显示：分选前脾细胞活率为96.02%，分选后获得的Treg细胞活率为96.16%（图a）。多次重复实验均证实，分选前后细胞活率无统计学差异（图b），表明本分选体系对细胞友好，不会影响细胞活性。

Treg分选核心操作流程仅需4步孵育与过柱：

1. 孵育 CD4抗体混合物（10分钟）
2. 孵育 SA磁珠 & CD25-PE抗体（15分钟）
3. 上柱，收集 CD4+ T细胞流出液
4. 向流出液中加入 PE磁珠（15分钟），上柱吸附，洗脱获得 CD4+CD25+ Treg

全流程可在50-60分钟内完成。配合瑞沃德多磁极模块，可实现多样本同时分选，极大提升实验效率。