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冰冻切片HE染色是怎样做的?一文讲清

2022.01.14

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上一期“详解术中冰冻切片流程,揭秘病理报告怎么来的?”(点击文字,即可查阅),我们了解到术中冰冻从接收标本到冰冻报告需在30分钟内完成,时间急任务重,每个环节都与时间赛跑,其中染色方法与常规石蜡切片大致相同为HE染色 。一起来get冰冻切片HE染色的具体步骤,来有效缩短制片时间吧~



冰冻切片HE染色步骤

(1)切片后固定,固定时间为30s-1min,清水稍冲洗1-2s。

(2)玻片浸没于含苏木素的染缸中,时间大概为3-5min;然后清水洗去苏木素,大概5-10s。

(3)再把玻片浸没于1%盐酸乙醇2s;然后清水冲洗1-2s。这个时候在显微镜下观察,细胞核呈紫蓝色,细胞浆无色说明操作无误。

(4)促蓝液(可以是自来水,或者是1%氨水)返蓝5-10s;清水稍冲洗1-2s,显微镜下观察,细胞核蓝色,说明操作无误。

(5)再把玻片浸没于含伊红的染色缸中30-60s,然后清水冲洗干净表面。显微镜下观察,细胞核蓝色,细胞浆为红色说明操作无误。

(6)染色完的片子需要做透明处理来延长保存时间。利用不同浓度的酒精(从低浓度—高浓度)和二甲苯进行该项操作。显微镜下观察,细胞核蓝色,胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈现出深浅不一的红色。

(7)中性树胶封片,染色完成。

一张优质的冰冻切片HE染片是怎样的?

一张优质的HE染色片应该具备切片完整、无皱褶、核质蓝红分明、对比清晰、染色适中、透明度好等属性。 


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▲瑞沃德切片机切出来的片子染色效果

切片完整、无皱褶”离不开一台稳定高质量切片机的支持,宁夏医科大学总医院心内科实验室使用后评价“瑞沃德冷冻切片机的切片效果很好,跟之前使用的进口切片机相比没什么区别,切片组织形态完整,也没有出现重叠现象,切出来的心脏组织切片平整无褶皱,高倍镜下组织状态更接近真实情况,高度推荐瑞沃德设备”。

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