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技术干货 | MCAO造模技术答疑(五)

2020.07.16

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第五期线栓MCAO造模技术答疑来了

快来看,你的难题如何解决



精选答疑

1、加热垫设置为37℃,室温25℃做实验,堵塞1h,发现没有梗死,38℃出现梗死,好像半影区很明显梗死大小不稳定,39℃梗死是否太大呢?


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答:手术过程中保证小鼠体温在 37°C,缺血时的温度会影响梗死体积的生成,温度过低,会由于低温保护作用,造成梗死灶体积过小或每只模型梗死体积不一致;而温度过高会加重脑损伤,导致梗死体积过大,动物容易死亡。


2、术后应该怎样具体护理才能降低小鼠死亡率?比如打什么抗生素和使用什么止痛药等等?

答:1)术后抗感染:手术后大多数动物死亡会源于术后感染,所以抗感染是重要的护理环节。首先切口周围应严格用碘伏消毒,消毒范围不应低于1.5 cm;同时,从术后当天开始,每天腹腔注射4万单位青霉素,连续注射7天;术后生活的笼具垫料也应进行严格的消毒灭菌,垫料需每天更换一次。


2)术后镇痛:术后切口强烈的疼痛,也是实验动物死亡因素之一。在缝合伤口后,可以选择性的以 2.5 mg/kg标准于小鼠尾静脉注射曲马多,以达到镇痛目的。


3)术后饮食:MCAO术后1周内,为死亡高发期,其中一个重要的原因就是术后自主进食不佳。术后应采用流食,可 以喂养奶粉,或用10%蔗糖代替。如若1天内小鼠仍没有进食行为,可以采用灌胃处理。


4)环境温度:术后饲养的环境温度应在 27°C±0.5°C,不宜过高,过高会出现灌注流速太大引起的脑出血,湿度为 70%±5%,通风良好,避免噪声及动物间的相互干扰。


3、有时候术后第2-3天死亡,解剖没有发现颅底出血,有哪些可能的原因?

答:首先要找出死亡原因,解剖死亡大鼠的脑,先看是否有蛛网膜下腔出血,如有出血,表明死因是进拴太深,以后注意插线深度;如无出血,则还要再看是否有严重的大脑半球水肿,如脑水肿严重,则表明死因是脑缺血时间太长,需要缩短缺血时间;如既无出血,又无明显的脑水肿,那就要注意动物状态或生活环境是否太差。


4、术后第2天发现解剖小鼠大脑背面出血,是手术伤到哪里了吗?

答:大脑背面出血可能是蛛网膜下腔出血,可能是线拴插入过深。


5、异氟烷麻醉手术插入线栓堵塞时死亡,拔线栓时死亡,分别是什么原因?

答:插栓时死亡原因:

a)麻醉剂量过深;

b)窒息:呼吸道分泌物增多,操作时压迫小鼠的气管及分离血管时损伤迷走神经,导致小鼠窒息死亡。

c)手术过程中失血过多:包括分离颈部血管时出血、血管破裂出血、血管夹闭不全出血、线栓头脱落出血、反复多次插入线栓出血等。

拔栓时死亡原因:

a)线栓已经插破血管,拔线时导致大出血;

b)拔栓时颈外动脉没有结扎好,导致大出血;

c)再灌注会加重小鼠的大脑损伤,小鼠无法承受。


6、术后声音沙哑,是怎么回事?

答:可能是控制声音的脑区缺血,导致小鼠声音沙哑。


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